純培養(yǎng)微生物

        純培養(yǎng)MAX重要的是在于微生物的生理研究，方法是依靠滅菌和分離。在自然界中，有的培養(yǎng)條件很困難，特別是具有密切共生關(guān)系的生物及進(jìn)行寄生性營(yíng)養(yǎng)的生物；也有一些在理論上不可能進(jìn)行純粹培養(yǎng)的生物。那么怎樣獲得純培養(yǎng)微生物呢？下面四種方法告訴您：

        一、單孢子或單細(xì)胞分離法

        采取顯微分離法從混雜群體中直接分離單個(gè)細(xì)胞或單個(gè)個(gè)體進(jìn)行培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)，稱(chēng)為單細(xì)胞（單孢子）分離法。單細(xì)胞他離法的難度與細(xì)胞或個(gè)體的大小成反比，較大的微生物如藻類(lèi)、原生動(dòng)物較容易，個(gè)體較小的細(xì)菌則較難。在顯微鏡下使用單孢子分離器進(jìn)行機(jī)械操作，挑取單孢子或單細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。也可以采用特制的毛細(xì)管在載玻片的瓊脂涂層上選取單孢子并切割下來(lái)，然后移到合適的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。單細(xì)胞分離法對(duì)操作技術(shù)有比較高的要求，多限于高度專(zhuān)業(yè)化的科學(xué)研究中采用。

        二、利用選擇性培養(yǎng)基分離法
        各種微生物對(duì)不同的化學(xué)試劑、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力，利用這些特性可配制合適某種微生物而限制其它微生物生長(zhǎng)的選擇培養(yǎng)基，用它來(lái)培養(yǎng)微生物以獲得純培養(yǎng)。
        另外，還可以將樣品預(yù)處理，消除不希望分離到的微生物。如加溫殺死營(yíng)養(yǎng)菌體而保留芽孢，過(guò)濾去除絲狀菌體而保留單孢子。
        三、平板劃線(xiàn)分離法
        有接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料，在無(wú)菌平板表面進(jìn)行平行劃線(xiàn)、扇形劃線(xiàn)或其他形式的連續(xù)劃線(xiàn)，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開(kāi)來(lái)，如果劃線(xiàn)適宜的話(huà)，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。
        四、稀釋倒平板法
        先將待分離的材料用無(wú)菌水作一系列的稀釋?zhuān)ㄈ?1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …），然后分別取不同稀釋液少許，與已溶化并冷卻至 45 ℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后，傾入滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿中，待瓊脂凝固后，制成可能含菌的瓊脂平板，電熱恒溫培養(yǎng)箱保溫培養(yǎng)一定時(shí)間即可出出菌落。如果稀釋得當(dāng)，在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個(gè)菌落，這個(gè)菌落可能就是由一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞繁殖形成的。隨后挑取該單個(gè)菌落，或重復(fù)以上操作數(shù)次，便可得到純培養(yǎng)。